PANDEMIA COVID-19 E IL RUOLO CRITICO DEL LABORATORIO

 

La diagnostica in vitro è essenziale per la clinica, nell’infezione SARS-CoV-2, nelle seguenti aree: a) la diagnosi eziologica, b) il monitoraggio dei pazienti, c) la sorveglianza sierologica. Il ruolo delle S.C. di laboratorio è principalmente di tipo reattivo, ma con migliaia di infettati, le virologie sono state saturate, essendo previste per un volume di attività normale “customer oriented”.

1. Il test per la diagnosi eziologica di SARS-CoV-2 è la Real Time PCR (protocollo OMS) (1) su campioni clinici respiratori o di siero, essenziale per la definizione di nuovo caso e per inviare i dati alla Sorveglianza Epidemiologica; è eseguito nei Laboratori di Riferimento Regionali, individuati dalle Direzioni Regionali Sanità; in caso di positività per SARS-CoV-2 il campione viene mandato per conferma all’ISS (2), secondo le direttive ministeriali (3).  L'OMS ha selezionato protocolli, a norma, per lo sviluppo di test RT-PCR, poi diffusi ai laboratori di riferimento mondiali; tutti i centri nazionali si sono adeguati (4). I campioni sono prelevati dalle basse vie respiratorie o dalle alte. Se un paziente fortemente sospetto, risulta negativo, si ripete il prelievo da siti diversi (naso, espettorato ecc.). Campioni di sangue, urine e feci possono essere inviati in laboratorio per approfondimenti. La manipolazione richiede precauzioni e DPI completi per il personale (5). 
2. Specifici test di laboratorio sono indicatori di evoluzione verso ARDS, CID, insufficienza multiorgano. La letteratura ha evidenziato le più importanti anomalie nel COVID-19: linfopenia, aumento di CRP, LDH, VES e D-dimero, ridotta albumina sierica. I parametri ematologici indice di progressione sono: leucocitosi, neutrofilia, linfopenia e MDW (distribuzione del volume dei monociti) (6). Sono prognostici LDH, AST, ALT, bilirubina totale, creatinina, troponina, D-dimero, tempo di protrombina (PT), pro-calcitonina e CRP (6). Tra i test di emostasi PT, D-dimero e coagulopatia da consumo predicono l’evoluzione infausta (6). Nei casi di COVID-19 grave spicca l'iperinfiammazione: ferritina, conta piastrinica, VES e score HS per HLH (linfoistiocitosi emofagocitica) indicano il rischio di progressione verso la mortalità (7). L’infiammazione non regolata altera i parametri N8R e NLR, decisivi per attuare un intervento tempestivo, basato su dosaggio longitudinale di linfociti e citochine (8). 
3. Il dosaggio di anticorpi anti-SARS-CoV-2, di classe IgM e IgG, ha valore di ricerca e di monitoraggio; i migliori kit si dimostrano accurati (89% sensibilità e 91% specificità) (9) e sono adatti per la sorveglianza sierologica.

Lessons learnt: le risorse sanitarie si sono rivelate insufficienti, ovunque nel mondo, per gestire il numero di pazienti; la scarsità di DPI ha causato il contagio dei tecnici. Nei laboratori, i sistemi analitici sono parzialmente chiusi, ma manipolazione dei campioni e aerosol non si possono evitare. Il reclutamento di nuovo personale ha aggiunto il carico dell’addestramento. La creazione di una rete tra i laboratori, con trasporto veloce dei campioni, è una soluzione possibile, purché la logistica sia organizzata in condizioni ottimali e in biosicurezza. Due aspetti finali: 1) il personale di laboratorio può venire infettato dal virus, come è avvenuto; 2) l’adeguamento alle limitazioni dei movimenti umani e del trasporto. Tali criticità amplificano la carenza di personale ed evidenziano la necessità di piani per l’emergenza epidemica (6). La cultura dell’HTA migliora le tecnologie, la sicurezza, e l’uso appropriato di risorse per fronteggiare la saturazione, suggerendo l’utilizzo dei POCT nelle unità di isolamento, con supervisione del laboratorio. Nei punti critici, anche sul territorio, essi hanno dei vantaggi: risposta rapida, prelievo capillare, nessuno spostamento di campioni infettivi, interfacciamento con la rete di laboratorio. Dal 2005, l’OMS invita i suoi stati membri a prevedere tali aspetti organizzativi in previsione di pandemie (10).

 

 Carla LAVARINI

 

BIBLIOGRAFIA

1. Corman V, Landt O, et al., Detection of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) by real-time RT-PCR. Eurosurveillance   2020; doi:10.2807/1560-7917.ES.2020.25.3.2000045.

2. Epicentro, Istituto Superiore di Sanita (ISS). Sistema di sorveglianza nazionale. https://www.epicentro.iss.it/coronavirus/sars-cov-2-sorveglianza-dati

3 .Annullamento e sostituzione della Circolare del Ministero della Salute n. 0009480 del 19 marzo 2020 “COVID-19: rintraccio dei contatti in ambito di sorveglianza sanitaria e aggiornamento delle indicazioni relative alla diagnosi di laboratorio di casi di infezione da SARS-CoV-2". Circolare del 20 marzo 2020  http://www.trovanorme.salute.gov.it/norme/renderNormsanPdf?anno=2020&codLeg=73714&parte=1%20&serie=null

4. World Health Organization. Laboratory testing strategy recommendations for COVID-19. Interim guidance, 22 marzo 2020; https://apps.who.int/iris/handle/10665/331509

5.Ministero della Salute. COVID-19. Aggiornamento della definizione di caso. Circolare del 09/03/2020; http://www.trovanorme.salute.gov.it/norme/renderNormsanPdf?anno=2020&codLeg=73622&parte=1%20&serie=null

6. Giuseppe Lippi and Mario Plebani, The critical role of laboratory medicine during coronavirus disease 2019 (COVID-19) and other viral outbreaks. Clin Chem Lab Med 2020; aop  https://doi.org/10.1515/cclm-2020-0240

7. Puja Mehta, Daniel F McAuley Michael Brown, Emilie Sanchez, Rachel S Tattersall, Jessica J Manson et al.,  On behalf of the HLH Across Speciality Collaboration.  UK Lancet, March 12, 2020; https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)30630-9

8. Jing Liu , Sumeng Li , Jia Liu , Boyun Liang  et al., Longitudinal characteristics of lymphocyte responses and cytokine profiles in the peripheral blood of SARS-CoV-2 infected patients. EBioMedicine (2020); https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2020.102763

9. Gigi Gronvall PhD, Nancy Connell PhD, Prof. Amanda Kobokovich, Rachel West PhD, et al., Developing a National Strategy for Serology (Antibody Testing) in the United States. Published on April 22, 2020 Copyright © 2020 Johns Hopkins University

10. Di Lorenzo Pradelli, Albert Wertheimer, Ceri J Phillips, Anke‑Peggy Holtorf, Farmacoeconomia in pratica: Tecniche di base e modelli. SEEd Editore 2014  ISBN 8897419585, 9788897419587